單克隆抗體技術(shù)的基本原理
更新時(shí)間：2019-12-21 點(diǎn)擊次數(shù)：848次
單克隆抗體是目前發(fā)展快的治療性生物大分子藥物，得益于其在癌癥、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、傳染病、心血管疾病和自身免疫疾病等方面的顯著療效，單抗藥的市場快速增長。單克隆抗體可按所要求的純度不同采用相應(yīng)的純化方法。一般采用鹽析、凝膠過濾和離子交換層析等步驟達(dá)到純化目的，也有采用較簡單的酸沉淀方法。目前有效的單克隆抗體純化方法為親和純化法。
單克隆抗體是指僅識別單一抗原表位的B細(xì)胞雜交瘤產(chǎn)生的同源抗體,特異性好,效價(jià)高,生物活性單一,理化性狀高度均一等特點(diǎn)。單克隆抗體已經(jīng)成為生物治療藥物的主要類別。隨著對生產(chǎn)力和成本效益要求的提高，生物產(chǎn)業(yè)仍然面臨著許多挑戰(zhàn)。
單克隆抗體制備主要步驟包括：動物免疫、細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞的篩選與單抗檢測、雜交瘤細(xì)胞的克隆化、單抗的鑒定及制備等。單克隆抗體具有高度均一性及對靶分子的高親和性、特異性， 已廣泛應(yīng)用于自身免疫性疾病、炎性疾病和癌癥的治療。單克隆抗體與相應(yīng)抗原的反應(yīng)性決定于其所識別的抗原表位， 確定相應(yīng)表位在抗原結(jié)構(gòu)上的位置是單克隆抗體篩選中的關(guān)鍵步驟。
單克隆抗體技術(shù)的基本原理：
要制備單克隆抗體需先獲得能合成專一性抗體的單克隆B淋巴細(xì)胞，但這種B淋巴細(xì)胞不能在體外生長。而實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)骨髓瘤細(xì)胞可在體外生長繁殖，應(yīng)用細(xì)胞雜交技術(shù)使骨髓瘤細(xì)胞與免疫的淋巴細(xì)胞二者合二為一，得到的骨髓瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞繼承兩種親代細(xì)胞的特性，它既具有B淋巴細(xì)胞合成專一抗體的特性，也有骨髓瘤細(xì)胞能在體外培養(yǎng)增殖永存的特性，用這種來源于單個(gè)融合細(xì)胞培養(yǎng)增殖的細(xì)胞群，可制備抗一種抗原決定簇的特異單克隆抗體。
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