RSR AQP4Ab試劑盒的檢測步驟如下
更新時(shí)間:2023-12-13 點(diǎn)擊次數(shù):714次
RSR AQP4Ab試劑盒是用于檢測抗水通道蛋白4抗體(AQP4Ab)的試劑盒,它的原理基于免疫學(xué)方法。水通道蛋白4(AQP4)是一種在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中廣泛分布的蛋白質(zhì),它在細(xì)胞膜上形成水分子通道,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的水分平衡。過去幾年中,研究發(fā)現(xiàn)AQP4Ab是一種針對AQP4的自身抗體,與多發(fā)性硬化癥(MS)相關(guān)。AQP4Ab可以結(jié)合在AQP4的表面,并誘導(dǎo)免疫系統(tǒng)攻擊AQP4,從而導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害。
RSR AQP4Ab試劑盒采用間接的酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)原理檢測患者血清中的AQP4Ab。試劑盒中的酶標(biāo)抗體是一種專門與AQP4Ab結(jié)合的抗體,該抗體經(jīng)過標(biāo)記酶標(biāo)物酶硫酸酯酶(HRP),可以發(fā)揮催化作用來生成發(fā)光信號。試劑盒中還包含用于探針結(jié)合的抗AQP4抗體,這個(gè)抗體是與細(xì)胞表面的AQP4結(jié)合的。試劑盒中的底物是TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯二胺),它在與HRP的作用下會產(chǎn)生可見的藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物。
RSR AQP4Ab試劑盒的檢測步驟如下:
1.將待檢血清標(biāo)本和試劑盒提供的負(fù)對照血清標(biāo)本稀釋后加入到試劑盒提供的酶標(biāo)板孔中。
2.孔中的AQP4Ab會與探針結(jié)合的抗AQP4抗體發(fā)生競爭結(jié)合。經(jīng)過洗滌步驟去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入酶標(biāo)抗體,它會與AQP4Ab結(jié)合。
3.經(jīng)過洗滌后,加入底物TMB和顯色緩沖液,樣本中存在AQP4Ab的孔中會出現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物。將反應(yīng)停止液加入后,反應(yīng)停止液與底物產(chǎn)生相互作用,停止酶催化反應(yīng)。通過酶標(biāo)儀檢測產(chǎn)生的藍(lán)色反應(yīng)產(chǎn)物的吸光度,根據(jù)吸光度值判斷是否存在抗AQP4抗體。