肌聯(lián)蛋白抗體檢測(cè)試劑盒正確使用方法
更新時(shí)間:2022-07-18 點(diǎn)擊次數(shù):512次
肌聯(lián)蛋白抗體檢測(cè)試劑盒其原理與ELISA類(lèi)似,所不同的是將可溶性抗體變?yōu)榧?xì)胞,并通過(guò)流式細(xì)胞儀測(cè)定陽(yáng)性率或熒光強(qiáng)度指標(biāo)來(lái)檢測(cè)待測(cè)抗體的結(jié)合情況或是效應(yīng)情況。該方法的優(yōu)點(diǎn)是選用攜帶抗原的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),細(xì)胞表面的抗原空間結(jié)構(gòu)更接近體內(nèi)存在形式,使待測(cè)結(jié)果更接近實(shí)際情況,另外該方法還避免了相應(yīng)抗原的制備純化過(guò)程。
如進(jìn)行親和力的檢測(cè),可采用梯度稀釋的IgG孵育同等細(xì)胞數(shù)的能表達(dá)特異性抗原的陽(yáng)性細(xì)胞和不能表達(dá)特異性抗原的陰性細(xì)胞,再用PE-抗 IgG抗體來(lái)檢測(cè)與陽(yáng)性細(xì)胞結(jié)合的IgG抗體,通過(guò)檢測(cè)平均熒光強(qiáng)度(MFI)計(jì)算抗體與靶細(xì)胞結(jié)合的平衡解離常數(shù)(KD)來(lái)判定親和力的強(qiáng)弱。
另外,由于抗體能夠以多種方式介導(dǎo)細(xì)胞殺傷。所以,細(xì)胞凋亡、補(bǔ)體介導(dǎo)的機(jī)制和抗體依賴(lài)性細(xì)胞毒性(ADCC)等都是可以通過(guò)分析來(lái)表征候選抗體的效應(yīng)。而流式細(xì)胞術(shù)能同時(shí)測(cè)定多個(gè)細(xì)胞群、多個(gè)參數(shù),并可追溯到每個(gè)細(xì)胞的定性和定量分析能力,所以常被用于進(jìn)行抗體效應(yīng)功能的檢測(cè)。
肌聯(lián)蛋白抗體檢測(cè)試劑盒正確使用:
1、檢測(cè)前請(qǐng)認(rèn)真閱讀說(shuō)明書(shū)全文,并按照要求仔細(xì)操作。
2、采樣前若有咀嚼口香糖、大量漱口水、飲食或抽煙等可能影響采樣質(zhì)量及檢測(cè)結(jié)果的行為,應(yīng)考慮適當(dāng)推遲采樣時(shí)間,至少在上述行為發(fā)生15分鐘后方能采樣。
3、采集樣本后,如30分鐘內(nèi)再次采集樣本進(jìn)行檢測(cè),可能會(huì)造成靈敏度降低,因此應(yīng)避免30分鐘內(nèi)重復(fù)取樣。
4、試驗(yàn)應(yīng)在4-30℃條件下進(jìn)行,低溫保存的檢測(cè)卡需要恢復(fù)室溫后再打開(kāi),以免吸潮。
5、檢測(cè)過(guò)程中,計(jì)時(shí)器或手表、一次性手套和生化污物桶是必要的使用物品,請(qǐng)自行準(zhǔn)備。