GADAb試劑盒樣品收集,處理及保存方法
更新時(shí)間:2022-03-28 點(diǎn)擊次數(shù):573次
GADAb試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)往預(yù)先包被人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
GADAb試劑盒樣品收集,處理及保存方法:
1.血清:使用不含熱源和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,采集血液后3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心的分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3.細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5.保存:如果樣本采集后不及時(shí)檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻的充分解凍。
GADAb試劑盒操作注意事項(xiàng):
1.試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱時(shí)結(jié)晶*溶解后再使用。
2.實(shí)驗(yàn)中不用他的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為應(yīng)性對照或者空白,預(yù)處理后的樣本無需稀釋,直接取10u1加樣即可。
4.嚴(yán)格按照說明書中表明的時(shí)間,加樣量及順序進(jìn)行溫育操作。
5.所有液體組分使用前充分搖勻。