淺析放射免疫法試劑盒方法原理
更新時間：2020-07-23 點擊次數(shù)：886次
放射免疫法試劑盒方法原理：
該方法以放射免疫測定的競爭性結(jié)合原理為基礎(chǔ)。標準品和未知樣品包被管中一起溫育，抗體包被于試管底部。溫育后將管內(nèi)物質(zhì)吸出或倒出，計數(shù)。在1～60μg/dl 范圍內(nèi)，以5 個血清標準坐標準曲線，未知樣品值可從標準曲線中查得。整個反應(yīng)在包被管中進行。對于血清，尿液或血漿樣本來說，未分離樣本的稀釋，蛋白質(zhì)的變性或提取步驟是必須的。除了非提取尿皮質(zhì)醇分析外，該藥盒也可用于尿液中游離皮質(zhì)醇的測定。首先用亞甲基氯化物提取尿液中皮質(zhì)醇，將提取物的一個等份式樣在包被管中直接脫水（試驗證明如果使用的亞甲基氯化物，不會有損于包被管）。為確保樣本中含有適當水平的蛋白質(zhì)，向每個包被管中加入10μl 皮質(zhì)醇血清空白，其余測定過程同血清，血漿和非提取尿皮脂醇。應(yīng)監(jiān)控使用亞甲基氯化物提取尿中皮)
放射免疫（RIA）的優(yōu)點
放射免疫分析具有許多其它分析方法*的優(yōu)點。它既具有免疫反應(yīng)的高特異性，又具有放射性測量的高靈敏度，因此能準確測定各種具有免疫活性的極微量的物質(zhì)。
?、膘`敏度高一般化學(xué)分析法的檢出極限為10～10g，而RIA通常為10ng（納克，ng）、10pg（皮克，pg），甚至10fg（飛克，fg）、10ag（阿克，ag)。
⒉特異性強由于抗原—抗體免疫反應(yīng)專一性強，所被測物一定是相應(yīng)的抗原。良好的特異性抗體，能識別化學(xué)結(jié)構(gòu)上非常相似的物質(zhì)，甚至能識別立體異構(gòu)體。
?、硲?yīng)用范圍廣據(jù)不*統(tǒng)計，目前至少已有300多種生物活性物質(zhì)已建立了RIA。它幾乎能應(yīng)用于所有激素的分析（包括多肽類和固醇類激素），還能用于各種蛋白質(zhì)、腫瘤抗原、病毒抗原、細菌抗原、寄生蟲抗原以及一些小分子物質(zhì)（如環(huán)型核苷酸等）和藥物（如毛地黃甙等）的分析，應(yīng)用范圍還在不斷擴展。近年來由于小分子半抗原制備抗體的技術(shù)有很大的發(fā)展，有人預(yù)測幾乎所有的生物活性物質(zhì)，只要其含量不低于RIA的探測極限，都可建立適當?shù)腞IA法。
?、床僮骱啽鉘IA所需試劑品種不多，可制成配套試劑盒；加樣程序簡單一次能分析大量標本，標本用量也少；反應(yīng)時間不長；測量和數(shù)據(jù)處理易于實現(xiàn)自動化；RIA屬體外分析技術(shù)，對患者無任何輻射危害。
放射免疫法試劑盒有三大主要要素 :標記物、標準品和抗體。此外 ,質(zhì)控血清也很重要 ,是否滿足質(zhì)控血清的要求是簡便、直接的檢驗試劑盒可靠性的條件。當然 ,還有一些輔助組分 ,如分離劑、緩沖液等試劑也不能忽視。
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